Inne

09 Sierpnia 2022 (Ostatnia aktualizacja 22.10.2024)

Preamplifikacja małej ilości DNA Amplifikacja po konwersji bisulfidem
MSP – PCR metylospecyficzny  
pcr success Prelude PreAmp Master Mix

2x zatężony master miks stworzony do preamplifikacji wielu genów jednocześnie. W jednym momencie można powielić >100 z bardzo małej ilości materiału (100 pg). Wygenerowane amplikony mogą następnie służyć jako klasyczna matryca do reakcji PCR, real-time PCR, genotypowania, enrichmentu, analiz SNP. Technologia zastosowana w Prelude chroni przed powstawaniem niespecyficznych wyników, które zazwyczaj towarzyszą podobnym zestawom. Kit jest kompletny i wygodny wystarczy dodać matrycę i primery. 

Tips and FAQs Zobacz jak Prelude Master Mix poradził sobie z preamplifikacją 162 genów z 10 pg materiału wyizolowanego z bloczka parafinowego
Achieve the most unbiased, target-specific preamplification from limited samples using Prelude PreAmp Master Mix (takarabio.com)

Strona produktu-> qPCR preamp master mix (takarabio.com) 

pcr success TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) 

  Polimeraza pozwalająca na pracę z DNA po konwersji bisulfidem. DNA ulega wielu modyfikacjom ułatwiającym lub blokującym transkrypcję np. metylowaniu. Konwersja bisulfidem pozwala na umiejscowienie umetylowanych nukleotydów. Sprawia, że nie umetylowane nukleotydy z cytozyną zamieniają się na uracylowe (pirymidyna -> purynę). W wyniku czego w amplikonie otrzymamy nukleotyd z tyminą. Generowane matryce mogą być bogate w ciągi jednego nukleotydu co sprzyja tzw. ślizganiu się polimerazy. Polimeraza EpiTaq jest na to odporna i została specjalnie stworzona, aby móc amplifikować DNA po konwersji. Pozwala na wydajną generację odcinków 150- 1000 bp zaopatrzonych w końce TA odpowiednie do klonowania TA. Zaopatrzona w hot start chroni przed generowaniem niespecyficznych produktów. Zestaw zawiera niezbędne odczynniki do przeprowadzenia reakcji.

Strona produktu->Methylation-specific PCR of bisulfite-treated DNA templates: TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) (takarabio.com) 

PCR with bisulfite-treated HeLa genomic DNA as template

PCR with bisulfite-treated HeLa genomic DNA as template

Zapytaj również o gotowe wzorcowe biblioteki.

pcr success Methylation-specific PCR: EpiScope MSP Kit 


Zestaw umożliwia analizę umetylowanego DNA poprzez metylo specyficzny PCR (MSP).
MS PCR pozwala na analizę regionów, w których nie umetylowane cytozyny zostały zamienione na uracyl po konwersji bisiarczanem (bisulfidem). Umetylowanie stanowi blok dla konwersji, w wyniku czego zmodyfikowane nukleotydy w sekwencji pozostają bez zmiany.
  Metoda wymaga zaprojektowania odpowiednich primerów, rozpoznających zmiany w sekwencji nukleotydów. Te miejsca następnie są analizowane na drodze odczytów z qPCR (SYBR).



Zestaw zwiera specyficzną polimerazę w zoptymalizowanym buforze, pozwalającą na MSP na DNA z duktami jednego nukleotydu (po konwersji bisiarczanem). Zapewnia wysoką produktywność fragmentów 200 bp i specyficzność wysoce zbliżoną do standardowej reakcji PCR. 

Strona produktu-> https://www.takarabio.com/products/cell-biology-assays/epigenetics/dna-methylation/episcope-msp-kit 


Kontrole metylowanego i niemetylowanego DNA są dostępne oddzielnie  

Control DNA for DNA methylation analysis (takarabio.com)

 

To może Cię zainteresować...

LogPhase – czytnik dla mikrobiologa
LogPhase – czytnik dla mikrobiologa

LogPhase – czytnik dla mikrobiologa

Wykorzystanie mikroorganizmów leży u podstaw przemysłu biotechnologicznego. Niezależnie od tego czy mowa jest o produkcji żywności, leków, alternatywnych tworzyw syntetycznych czy biopaliw, to niezbędne jest badanie tempa i charakterystyki wzrostu drobnoustrojów.

CRISPR/Cas9 – historia, zastosowania i nowe metody syntezy ssDNA
CRISPR/Cas9 – historia, zastosowania i nowe metody syntezy ssDNA

CRISPR/Cas9 – historia, zastosowania i nowe metody syntezy ssDNA

Emmanuelle Charpentier i Jennifer A. Doudna zostały w 2020 roku uhonorowane Nagrodą Nobla w dziedzinie chemii za rozwój metody CRISPR/Cas9, nazywanej potocznie precyzyjnymi nożyczkami genetycznymi. Należy jednak pamiętać, że zainteresowanie wielu badaczy oraz jednostek naukowych na całym Świecie tym niezwykle precyzyjny narzędziem do edycji genów sięga późnych lat 80 tych XX wieku.

In-Fusion® prawdziwy kombajn w Twoim Laboratorium!
In-Fusion® prawdziwy kombajn w Twoim Laboratorium!

In-Fusion® prawdziwy kombajn w Twoim Laboratorium!

Prężny rozwój technik genetyki, biofizyki i biochemii przypadający na lata 70 XX w., pozwolił na powstaje nowej dyscypliny badawczej zwanej biologią molekularną. Jedną z technik, która zrewolucjonizowała pracę z materiałem genetycznym była opracowana w 1973 roku pierwsza metoda łączenia sek...

Zobacz wszystkie