VectaPlex™ Antibody Removal Kit
Poznaj skuteczną drogę do multipleksowych barwień immunofluorescencyjnych (IF).
VectaPlex™ to zestaw przeznaczony do usuwania przeciwciał i innych niekowalencyjnie związanych odczynników detekcyjnych, ze skrawków tkanek FFPE, w protokołach barwienia immunofluorescencyjnego, lub w metodzie wzmocnienia sygnału tyramidu (TSA). Metoda zachowuje morfologię tkanki umożliwiając sekwencyjne bawienia tego samego skrawka kolejnymi przeciwciałami.
Usunięcie przeciwciał, nie tylko ułatwia wykrywanie kolejnych antygenów w obrębie tej samej tkanki, ale także upraszcza projektowanie panelu przeciwciał, ponieważ można zastosować przeciwciała pierwszorzędowe, niezależnie od gatunku, hosta lub izotypu.
Korzyści
⦁ uzyskanie kompleksowej, przestrzennej informacji o lokalizacji biomarkerów z każdego skrawka tkanki.
⦁ możliwość zobrazowania ponad 6 różnych antygenów w jednym skrawku tkanki za pomocą dwukolorowego obrazowania fluorescencyjnego i standardowych odczynników IF.
⦁ multipleksowanie IF w temperaturze pokojowej przy minimalnym uszkodzeniu tkanki lub utracie antygenowości.
⦁ zachowanie cennej próbki w IF i TSA; również w przypadku wrażliwych tkanek takich jak płuca, skóra i piersi.
⦁ barwienie wieloma przeciwciałami pierwotnymi tego samego hosta, oraz jednym przeciwciałem wtórnym bez niebezpieczeństwa wystąpienia reakcji krzyżowej.
⦁ zmniejsza potrzebę optymalizacji sekwencji, w której przeciwciała są wiązane podczas TSA.
Wizualizacja
Poniższe 2 zdjęcia możliwości zestawu VectaPlex™
Obraz złożony, wygenerowany z pojedynczych obrazów wykonanych podczas sześciu rund barwienia immunofluorescencyjnego przy użyciu VectaPlex. Tkanka FFPE żołądka wybarwiona sekwencyjnie sześcioma mysimi przeciwciałami pierwotnymi: CD20 (czerwone), CD34 (żółte), Desmina (cyjan), AE1/AE3 (magenta), CD3 (szary), Vimenn (zielony). Użyto również DAPI do barwienia kontrastowego, oraz zestaw Vector® TrueView® w celu wytłumienia fluorescencji tła.
Zdjęcie ilustruje, jak skutecznie VectaPlex zachowuje morfologię tkanki, nawet po kilku rundach użycia, w przeciwieństwie do protokołów wymagających obróbki termicznej. Zobrazowany jest skrawek FFPE raka piersi, bariony kontrastowo hematoksyliną i eozyną dla lepszej wizualizacji.
Zdjęcie wykonano po trzech rundach barwienia tyramidem. VectaPlex stosowano po każdej rundzie. Zobrazowano skrawek FFPE migdałka, po sekwencyjnym znakowaniu trzema mysimi przeciwciałami pierwotnymi – CD3 (czerwone), CD68 (zielone), AE1/AE3 (fioletowe). Do detekcji użyto zestaw Opal 3-plex TSA Manual Detection Kit, oraz zastosowano barwienie kontrastowe DAPI.
Materiały do pobrania
